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Título [Principal]: Punção aspirativa percutanea do epididimo (PESA) : estudo quantitativo, histologico e estereologico em ratos
Título [Outro Idioma]: Percutaneous epididymal sperm aspiration (PESA) : quantitative, histological and stereological study in rats
Autor(es): Ricardo Destro Saade
Palavras-chave [PT]:

PESA , Azoospermia , Estereologia , Epididimo , Histologia
Palavras-chave [EN]:
PESA, Azoospermia , Stereology , Epididyms , Histology ,
Área de concentração: Cirurgia
Titulação: Doutor em Cirurgia
Banca:
Carlos Arturo Levi D'Ancona [Orientador]
Sidney Glina
Fabio Firmbach Pasqualotto
Adriano Fregonesi
Fernandes Denardi
Resumo:
Resumo: Introdução: O tratamento da infertilidade masculina tem evoluído muito nas últimas décadas. O advento de técnicas de reprodução assistida (RA) e, particularmente, a injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) tornaram possível o tratamento de indivíduos até então considerados inférteis, como os casos de azoospermia obstrutiva e os de azoospermia não obstrutiva. Nestes casos, na impossibilidade de correção cirúrgica, outros procedimentos de obtenção de espermatozóides podem ser realizados como a aspiração microcirúrgica dos epidídimos (MESA), punção aspirativa percutânea dos epidídimos (PESA), aspiração testicular de espermatozóides (TESA) ou a extração testicular (TESE). Objetivos: A proposta de trabalho foi verificar a obtenção de espermatozóides viáveis em até cinco punções percutâneas do epidídimo. Analisar as alterações histológicas inflamatórias e cicatriciais, assim como a densidade de fibras de músculo liso e colágenas nos epidídimos de ratos, após punções. Material e método: O grupo piloto consistiu em quatro animais, sendo dois para estudo da anatomia e da histologia do epidídimo normal e outros dois para avaliação dos efeitos da vasectomia. A vasectomia bilateral foi realizada por meio de laparotomia infra-umbilical. Foi padronizado o lado direito para estudo e o esquerdo como controle. O grupo estudado consistiu em 50 ratos que realizaram vasectomia e foram separados em cinco grupos de I a V, contendo 10 animais cada. Os animais do grupo I foram submetidos a uma punção percutânea trans-escrotal; II a duas punções; III a três punções; IV a quatro punções; V a cinco punções. As punções dos epidídimos foram feitas após 30 dias da vasectomia, com escalpe 25G na cabeça do epidídimo. O material extraído foi suspenso em meio de cultura HTF e analisado em câmara de Makler. O intervalo entre cada punção foi de 15 dias e os animais foram sacrificados após 15 dias da última punção. Os epidídimos foram fixados em líquido de Bouin. Foram realizados estudos histológicos e estereológicos dos epidídimos puncionados. Resultados: O número médio de espermatozóides recuperados nas punções foi de: 48,78 x 106 /ml, 37,55 x 106 /ml, 26,33 x 106 /ml, 33,90 x 106 /ml e 41,34 x 106 /ml, nos grupos I a V, respectivamente. Após a análise histológica, observou-se que as variáveis infiltrado linfoplasmocitário, reação granulomatosa, fibrose e desarranjo estrutural apresentaram diferença significativa a partir da segunda punção. O efeito cumulativo das punções somente foi observado nas variáveis infiltrado linfoplasmocitário e fibrose, mostrando que existe diferença significativa entre os grupos I e II em relação aos grupos III, IV e V. No estudo estereológico, a densidade volumétrica do tecido conjuntivo foi de 21,56%, 27,60%, 35,67%, 37,56% e 38,60% no lado puncionado nos grupos I a V (p<0,05). Conclusões: No presente estudo, verificamos a obtenção de espermatozóides em todos os grupos até cinco punções. Todos os animais apresentaram alterações histológicas significativas dos epidídimos, quando comparados ao grupo controle, a partir da segunda punção, exceto na variável necrose. Somente nas variáveis infiltrado linfoplasmocitário e fibrose foram observadas efeito cumulativo das PESA. O estudo estereológico demonstrou aumento da densidade volume do tecido conjuntivo dos epidídimos provocado pelas punções

Abstract: Introduction: The treatment of male infertility had a great development in the last decades. The advent of assist reproductive techniques and specially the intra-cytoplasmic sperm injection (ICSI) has allowed the treatment of these patients otherwise considered infertile. Patients with obstructive and non-obstructive azoospermia, whose surgical reconstruction is not possible, can be submitted to retrieval spermatozoa procedures including microsurgical epididymal sperm aspiration (MESA), percutaneous epididymal sperm aspiration (PESA) testicular sperm extraction (TESE) and testicular sperm aspiration (TESA). Objectives: To verify the retrieval of viable spermatozoa within up to five percutaneous epididymal sperm aspirations and to evaluate the histological and stereological modifications in the rat epididymis after the procedures. Material and Methods: The pilot group consisted of four animals, two of them were used in the study about anatomy and histology of normal epididymis. The other two were used to verify the effects of the vasectomy. These procedures were performed through infra-umbilical laparotomy. The right side was standardized for the study group and the left for control. A total of 50 Wistar rats underwent vasectomy procedures and were distributed into five groups I to V, totalizing 10 animals each. In the group I, the animals underwent to one PESA procedure, II two, III three, IV four and V five. The epididymal punctures were done with 25G scalp in the caput after 30 days of the vasectomy and consecutively after 15 days of the previous puncture. The material extracted was suspended in HTF solution culture and analyzed in a Makler chamber. The epididymis were fixed in Bouin technique. Histological and stereological analyses were performed in the punctured epididymidis. Results: The number of retrieved spermatozoa was: mean 48.78 x 106 /ml, 37.55 x 106 /ml, 26.33 x 106 /ml, 33.90 x 106 /ml e 41.34 x 106 /ml, from group I to V. The histological analyses included evaluation of infiltration of lymphocytes and plasmocytes, granulomatous reaction, fibrosis and structural disorder; these alterations presented significant differences after the second puncture. The cumulative effect was observed only within the variables: lymphocytic and plasmocytic infiltrate and fibrosis. It was found differences in the groups I and II in comparison with III, IV and V. The stereological analyzes showed significant increase in connective tissue volume 21.56%, 27.60%, 35.67%, 37.56% and 38.60% from group I through V. Conclusions: In this study, it was performed retrieval of spermatozoa in all groups up to five punctures. All the animals presented histological alterations in the epididymis after the second puncture when compared to the control group, except necrosis, and only lymphocytic and plasmocytic infiltrate and fibrosis were shown as cumulative effects within the punctures. The stereological analyses showed increase of connective tissue volume that was caused by the punctures
Data de Defesa: 30-08-2006
Código: vtls000395668
Informações adicionais:
Idioma: Português
Data de Publicação: 2006
Local de Publicação: Campinas, SP
Orientador: Carlos Arturo Levi D'Ancona, Paulo Augusto Neves
Instituição: Universidade Estadual de Campinas . Faculdade de Ciências Médicas
Nível: Tese (doutorado)
UNICAMP: Programa de Pós-Graduação em Cirurgia

Dono: admin
Criado: 01-06-2007 11:58
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