Consultar: Faculdade de Odontologia - FOP

Título [Principal]: Avaliação de metodos bioquimicos e sorologicos na caracterização de especies de Candida isoladas da cavidade bucal de humanos
Autor(es): Janaina Aparecida de Oliviera Rodrigues
Palavras-chave [PT]:

Leveduras (Fungos) , Antigenos , Imunologia , Eletroforese em gel
Titulação: Mestre em Biologia Buco-Dental
Banca:
Jose Francisco Hofling [Orientador]
Celso Paulino da Costa
Denise Madalena Palomari Spolidorio
Resumo:
Resumo: O projeto de pesquisa teve como objetivo a avaliação de métodos bioquímicos e sorológicos na caracterização de espécies de Candida isoladas da cavidade bucal de humanos, com ênfase na Taxonomia, Sistemática e estudos epidemiológicos. As linhagens empregadas são representativas de 5 espécies de Candida: 97-a, F-72, E-37, 17-b e CBS-562T (C. albicans), FCF405 e FCF-152 e CBS-566T (C. guilliermondii), 21-c, 7-a e CBS-604T (C. parapsilosis), 1M-90, 4-c e CBS-573T (C. krusei), 1-b, FCF-430, Ct-4 e CBS-94T (C. tropicalis). Como controle negativo foi empregada a linhagem IZ-1339 (Kluyveromyces marxianus). Os métodos bioquímicos e sorológicos utilizados, se basearam no cultivo em meio cromogênico CHROMagar Candidaâ, ensaio imunoenzimático (ELISA indireto) e eletroforese de proteínas SDS-P AGE. Os resultados obtidos nos testes com CHROMagar Candida@ revelaram especificidade para as espécies C. albicans, C. tropicalis e C. krusei; as espécies C. guilliermondii e C. parapsilosis apresentaram coloração rosa e creme respectivamente, o que não é especifico para essas espécies. O método SDS- P AGE revelou diferenças significativas nos perfis eletroforéticos dos extratos protéicos intracelulares obtidos, apresentando diminuição no número de bandas protéicas em relação ao aumento do tempo de centrifugação. Os ensaios imunoenzimáticos (ELISA) não revelaram diferenças na reatividade para os extratos, expressa em densidade ótica (D. O.), quando comparados. Em ordem decrescente de especificidade o SDSP AGE mostrou-se mais eficiente na caracterização dos isolados agrupando-os em espécies, seguida do uso do CHROMagar Candidaâ que apresentou maior especificidade para C. albicans, C. tropicalis e C. krusei, mas não para as demais espécies. O método de ELISA utilizando anticorpos policlonais, se mostrou pouco efetivo na identificação das espécies por apresentar um alto grau de reação cruzada com outras leveduras

Abstract: This work had the purpose to evaluate biochemistry and serological methods to characterize Candida species from human oral cavity, emphasizing taxonomy, systematic and epidemiological studies. The strains used represent the five Candida species: 97-a, F-72, E-37, 17-b and CBS-562T (C. albicans), FCF-405 and FCF-152 and CBS-566T (C. guilliermondii), 21-c, 7-a and CBS604T (C. parapsilosis), IM-90, 4-c and CBS-573T (C. krusei), l-b, FCF-430, Ct-4 and CBS-94T (C. tropicalis). As negative control the strain IZ-1339 (Kluyveromyces marxianus) were used. The biochemical and serological methods used were based upon the growth in cromogenic medium CHROMagar Candidaâ, ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) and protein electrophoresis (SDS-PAGE). The method CHROMagar Candidaâ showed specificity for the C. albicans, C. tropicalis and C. krusei species but it was not able to identify the C. guilliermondii e C. parapsilosis species, since it showed rose and vanilla color, respectively, which is not specific for these two species. The SDS-PAGE showed significative differences in the electrophoretic pattems from the proteic cellular extracts, showing a decrease of the number of bands compared to the increase of the centrifugation time. The ELISA could not present differences among the cell extracts, expressed in O.D., when compared. In an increasing order of specificity, the SDS-PAGE seemes to be the more efficient for the strains characterization being able to group the species, followed by the CHROMagar Candidaâ which showed specificity for the C. albicans, C. tropicalis and C. krusei, but not for the remaining species studied. The ELISA using polyclonal antibodies was ineflective to identify species due to the high level of cross-reaction
Data de Defesa: 06-05-2000
Código: vtls000197677
Informações adicionais:
Idioma: Português
Data de Publicação: 2000
Local de Publicação: Piracicaba, SP
Orientador: Jose Francisco Hofling
Instituição: Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Nível: Dissertação (mestrado)
UNICAMP: Programa de Pós-Graduação em Biologia Buco-Dental

Dono: admin
Criado: 12-04-2007 10:21
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